Молекулярно-биологические исследования в Люберцах
Проведение полимеразной цепной реакции «в реальном времени» (Real Time PCR) является наиболее качественным и быстрым методом исследования. Метод ПЦР универсален – одна порция биологического материала позволяет провести исследования на наличие возбудителей целого ряда заболеваний.
Почему ПЦР диагностика обладает такой ценностью?
Одним из существенных преимуществ метода ПЦР является высокая чувствительность – от 95 до 100%.
На сегодняшний день молекулярно-генетические маркеры рутинно используются в клинической практике на всех этапах оказания онкологической помощи – в профилактике, ранней и дифференциальной диагностике, а также лечении пациентов, страдающих злокачественными новообразованиями.
Наиболее значимыми представляются два направления клинико-прикладных исследований — диагностика наследственных раковых синдромов и индивидуальный подбор лекарственных препаратов на основе молекулярных характеристик опухоли.
Классификация методов исследования
Все молекулярно-биологические методы исследования делятся на три большие группы:
- Амплификационные (с использованием множества ферментов). Сюда относится ПЦР – полимеразная цепная реакция, которая играет большую роль во многих из методов диагностики.
- Неамплификационные. Эта группа методов связана непосредственно с работой смесей нуклеиновых кислот. Примерами являются 3 вида блоттингов, in situ гибридизация и т.д.
- Методы, основанные на распознавании сигнала от молекулы зонда, который связывается с определенной ДНК или РНК зонда. Пример - система гибридизации в растворе Hybride Capture System (hc2).
Ферменты, которые могут использоваться в молекулярно-биологических методах исследования
Многие методы молекулярной диагностики подразумевают использование обширного диапазона ферментов. Ниже представлены применяемые наиболее часто:
- Рестриктаза – «режет» молекулу ДНК на необходимые части.
- ДНК-полимераза – синтезирует двухцепочечную молекулу дезоксирибонуклеиновой кислоты.
- Обратная транскриптаза (ревертаза) – используется для синтеза ДНК на матрице РНК.
- ДНК-лигаза – отвечает за образование фосфодиэфирных связей между нуклеотидами.
- Экзонуклеаза – удаляет нуклеотиды с концевых участков молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты.
ПЦР в диагностике инфекций
Преимущества метода ПЦР (чувствительность и специфичность) определяют широкий спектр применения в современной медицине. Метод ПЦР автоматизирован и позволяет получить результаты анализа в течение одного рабочего дня. ПЦР используется в акушерстве, гинекологии, неонатологии, педиатрии, урологии, венерологии, нефрологии, клинике инфекционных болезней, офтальмологии, неврологии, фтизиопульмонологии и др.
Основные области применения ПЦР-диагностики:
- диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний различной локализации;
- контроль эффективности проведенной терапии;
- уточнение вида возбудителя.
Метод ПЦР позволяет проводить диагностику многих инфекционных заболеваний со сложной серологической картиной, определять «вирусную нагрузку» в крови пациента, выявлять дисбиоз урогенитального тракта у женщин и мужчин.
Наследственные опухолевые синдромы
Наследственные опухолевые синдромы – группа заболеваний, проявление которых заключается в передаче из поколения в поколение практически фатальной предрасположенности к тому или иному виду рака. Они составляют незначительную пропорцию от общего числа новообразований (около 1%), хотя для отдельных локализаций (молочная железа, яичник, толстая кишка), их удельный вклад достигает более высоких показателей (5-20%).
Причиной подобных заболеваний является носительство наследуемой «раковой» мутации. Лица, имеющие такое генетическое повреждение, до определенного момента остаются практически здоровыми, однако они обладают фатально увеличенным риском возникновения неоплазм – пенетрантность соответствующих мутаций обычно составляет 85-100%.
Подавляющее большинство известных онкогенов, вовлеченных в патогенез наследственных опухолевых синдромов, составляют т.н. супрессорные гены. Эти генетические элементы в норме осуществляют негативный контроль клеточного деления, регулируют процессы репарации ДНК, запускают механизмы программируемой клеточной гибели и т.д.
Если происходит их инактивация, то соответствующий клон приобретает новые качества (ускоренная пролиферация, иммортализация, патологическое накопление мутаций и т.д.). Подобные события ускоряют приобретение новых критических генетических нарушений – возникает цепная реакция, в конечном счете, приводящая к образованию опухоли.
Отзывы ()